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    人直腸組織提取物運輸和保存
    更新時間:2024-03-12   點擊次數:45次

    人直腸組織提取物運輸和保存:

    視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

    1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

    2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

    一.培養基及培養凍存條件準備:

    1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

    2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

    二、實驗要點及說明:

    1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

    2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

    3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

    4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

    5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。


     

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